نحوه انجام کروماتوگرافی ساده: 10 نکته قدم 25

کروماتوگرافی ساده: راهنمای گام به گام

کروماتوگرافی یک تکنیک همه کاره است که در زمینه های مختلف علمی برای جداسازی و تجزیه و تحلیل مخلوط مواد مورد استفاده قرار می گیرد. این شامل جداسازی اجزای مختلف بر اساس تمایل آنها به فاز ثابت و فاز متحرک است. کروماتوگرافی ساده که با نام کروماتوگرافی کاغذی نیز شناخته می شود، روشی ساده است که می تواند با مواد اولیه انجام شود. در زیر راهنمای جامعی است که مراحل و نکاتی را برای انجام کروماتوگرافی ساده بیان می کند.

مواد مورد نیاز:

1. کاغذ کروماتوگرافی یا کاغذ فیلتر
2. حلال (مانند آب، الکل یا استون)
3. مداد یا خودکار
4. مخلوط نمونه مورد تجزیه و تحلیل
5. خط کش یا اندازه گیری نوار
6. شیشه یا لیوان شیشه ای
7. گیره میل یا کلاسور
8. دستمال کاغذی

مرحله 1: آماده کردن کاغذ کروماتوگرافی

1. یک نوار از کاغذ کروماتوگرافی را به اندازه دلخواه ببرید. نوار باید به اندازه ای بلند باشد که به ته شیشه یا بشر برسد.
2. با استفاده از خط کش یا متر، یک خط افقی در حدود 2 سانتی متر از لبه پایین نوار کاغذ علامت بزنید. این خط به عنوان نقطه شروع برای کاربرد نمونه عمل خواهد کرد.

مرحله 2: آماده سازی نمونه

1. مخلوطی را که می‌خواهید تجزیه و تحلیل کنید، تهیه کنید و مطمئن شوید که به شکل مایع است.
2. یک خلال دندان تمیز، لوله مویرگی یا برس کوچک را در محلول نمونه فرو کنید.
3. لکه کوچکی از محلول نمونه را مستقیماً روی خط مشخص شده نوار کاغذ کروماتوگرافی بمالید.

مرحله 3: راه اندازی اتاقک کروماتوگرافی

1. یک شیشه یا لیوان شیشه ای بردارید و مقدار کمی حلال داخل آن بریزید، به اندازه ای که کف آن را حدود 1 سانتی متر بپوشاند.
2. یک دستمال کاغذی را به عنوان فتیله در بالای شیشه/پیمانه قرار دهید تا حلال را بکشید.
3. نوار کاغذ کروماتوگرافی را با استفاده از گیره لباس یا گیره چسب به داخل شیشه/پیمانه وصل کنید. مطمئن شوید که نوار کاغذی با حلال تماس نداشته باشد.

مرحله 4: اجرای کروماتوگرافی

1. برای جلوگیری از تبخیر، روی شیشه/بشیرین را با درب یا پوشش پلاستیکی بپوشانید و برای مدتی دست نخورده بگذارید.
2. همانطور که حلال از نوار کاغذی بالا می رود، اجزای نمونه را با خود حمل می کند و آنها را بر اساس تمایل آنها به فاز ساکن جدا می کند.
3. هنگامی که قسمت جلویی حلال به بالای نوار کاغذی رسید، آن را از شیشه/بنیکا خارج کنید و اجازه دهید کاملاً خشک شود.

مرحله 5: تجزیه و تحلیل و تفسیر نتایج

1. کروماتوگرام خشک شده را برای نوارها یا لکه های جدا شده با رنگ ها یا شدت های مختلف بررسی کنید.
2. مسافت طی شده توسط هر جزء از خط شروع (جلو حلال) را با استفاده از خط کش یا متر نوار اندازه گیری و ثبت کنید.
3. مقدار Rf (ضریب نگهداری) را برای هر جزء با تقسیم مسافت طی شده بر کل مسافت طی شده توسط جبهه حلال محاسبه کنید.

نکاتی برای کروماتوگرافی ساده موفق:

1. حلال مناسبی انتخاب کنید که به طور موثر اجزای مخلوط شما را بدون ایجاد پخش یا همپوشانی بیش از حد جدا کند.
2. اگر مطمئن نیستید از کدام حلال استفاده کنید، با اعمال نقاط کوچک نمونه خود بر روی نوارهای جداگانه و آزمایش حلال های مختلف برای تعیین اینکه کدام یک جداسازی بهینه را فراهم می کند، یک آزمایش مقدماتی انجام دهید.
3. از بارگذاری بیش از حد کاغذ کروماتوگرافی با محلول نمونه بیش از حد خودداری کنید، زیرا می تواند منجر به جدا شدن ضعیف و لکه دار شدن نوارها شود.
4. مطمئن شوید که نقاط نمونه شما کوچک و متمرکز هستند تا نتایج واضح و مشخصی بدست آورید.
5. برای اطمینان از تکرارپذیری و مقایسه نتایج، شرایط آزمایشی خود، از جمله نوع حلال، غلظت، و عوامل محیطی را پیگیری کنید.
6. از کاغذ کروماتوگرافی تازه برای هر آزمایش برای جلوگیری از آلودگی یا انتقال اجزای آزمایش‌های قبلی استفاده کنید.
7. در صورت لزوم، فرآیند کروماتوگرافی را چندین بار تکرار کنید تا به جداسازی بهتر یا تایید نتایج برسید.

3 انتشارات مرجع معتبر یا نام دامنه استفاده شده:

1. انجمن سلطنتی شیمی (rsc.org): انجمن سلطنتی شیمی یک انجمن علمی مشهور است که اطلاعات قابل اعتماد و معتبری را در مورد موضوعات مختلف علمی، از جمله تکنیک های کروماتوگرافی ارائه می دهد.
2. انجمن شیمی آمریکا (acs.org): انجمن شیمی آمریکا یک سازمان پیشرو در زمینه شیمی است که منابع ارزشمند و انتشارات مرتبط با کروماتوگرافی و سایر رشته های علمی را ارائه می دهد.
3. Analytical Chemistry (analyticalchemistry.acs.org): Analytical Chemistry یک مجله با داوری است که توسط انجمن شیمی آمریکا منتشر می شود و پیشرفت ها و کاربردها در تکنیک های تحلیلی، از جمله کروماتوگرافی را پوشش می دهد.